왜 GAPDH가 Western Blot에서 사용 되는가? + 예제

왜 GAPDH가 Western Blot에서 사용 되는가? + 예제
Anonim

대답:

GAPDH는 종종 로딩 컨트롤로 사용됩니다.

설명:

웨스턴 블 랏팅에서는 종종 GAPDH를 로딩 컨트롤로 사용합니다. 이것이 의미하는 바는 GAPDH를 탐색함으로써 우리가 얼룩의 다른 차선에 단백질을 같은 양으로 적재했다는 것을 확인할 수 있다는 것입니다.

사용 예 - 우리는 세포에서 특정 단백질의 상승을 일으키는 것으로 생각되는 질병이 있다고 말합니다. 우리는 "건강한"세포의 시료와 "병이있는"세포의 시료를 만들 것입니다. 우리는 서양 얼룩에 대한 젤에 두 샘플의 등가 단백질 양을로드합니다.

우리가 관심있는 단백질에 대해 오탐을 조사한 후에 질병이있는 세포에서 단백질 수준이 실제로 높아진다는 것을 알 수 있습니다 (즉, 더 어두운 밴드가 오점에서 생성됨). 이 단백질의 증가가 세포에서의 발현의 변화로 인한 것임을 입증하기 위해 (즉, 더 많은 스텐 스 밴드는 세포에서 단백질 발현의 변화에 의해 야기되며, 우연히 더 많은 단백질을 발사하지 않습니다 "건강한"샘플보다 "질병"샘플의 경우) 우리는 GAPDH에 대한 블롯을 조사하여 총 단백질 수준이 두 차선에서 모두 동일 함을 보여줍니다.

따라서 이것을 수행함으로써 우리는 동등한 단백질이 2 개의 차선에 적재되어 있고, 관찰중인 밴드 강도의 변화가 관심있는 단백질에 대한 단백질 발현의 변화로 인한 것임을 보여줍니다.