대답:
물질에 대한 전하 및 결합 특성에 기초하여 상이한 단백질을 분리하는 공정이다.
설명:
다른 pH에서 다른 단백질은 다른 전하를 가지고있다. 설정된 pH에서 단백질의 혼합물을 배치함으로써 서로 다른 전하 특성을 갖는 단백질을 함유하는 혼합물을 가질 수 있습니다.
이 단백질 혼합물을 전하를 띤 물질을 포함하는 컬럼 위에 부으면 컬럼은 반대 전하 내에 단백질을 바인딩 할 것입니다.
그런 다음 서로 다른 양의 이온을 함유 한 여러 용액을 사용하여 컬럼에서 단백질을 용리 (제거) 할 수 있습니다.
예를 들어 특정 단백질을 정제하고자하는 단백질이 혼합되어 있다고 가정 해보십시오. 관심있는 단백질이 특정 pH에서 양전하를 띠는 것을 알았 으면 음전하 물질이 담긴 컬럼에 혼합물을 부을 수 있습니다.
전하를 띠지 않았거나 음전하를 띠지 만 모든 단백질은 곧장 컬럼을 통해 흐른다. 그런 다음 컬럼에서 음전하를 완료 할 수있는 양이온으로 컬럼을 넘치게하여 양극으로 채워진 단백질을 방출 할 수 있습니다. 그러면이 경쟁으로 인해 관심 단백질이 용출됩니다.
다음은 이러한 상황의 예입니다.
각 트레이는 다른 농도의 완충액을 함유하고 있으며 175 mM 샘플 (상단 왼쪽 구석)에서 볼 수 있듯이 매우 적은 적색 / 갈색 단백질이 완충 막에 결합되어 있으며 완충 막에있는 이온과 (완충액의 이온은 더 많아서 단백질이 결합하는 것을 막았 기 때문에 "이겼다"). 오른쪽 하단의 샘플에서 많은 단백질이 결합 부위에 대해 경쟁하기 위해 존재하는 이온이 적기 때문에 많은 단백질이 막에 결합되어 있습니다.
이 비디오에서 작동중인 음이온 교환 크로마토 그래피를 볼 수 있습니다: